細菌涂片及細菌染色是微生物學的基本技術，也是觀察細菌更簡單且行之有效的方法，是微生物檢測人員常用技能之一。通常情況下，由于細菌個體較小，較透明或半透明，如未經染色往往不以觀察識別。因此借助于染色法可以使細菌著色，與視野背景形成鮮明對比，從而易于在顯微鏡下進行觀察。

微生物檢測常見的細菌染色方法包括簡單染色、負染色、革蘭氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、莢膜染色、死活染色。制備細菌染色片一般要經過涂片、固定、染色、水洗、干燥等步驟，然后用微儀顯微鏡觀察。上期介紹了前面2種方法，下面顯微鏡廠家給您介紹第三第四種方法。

3. 革蘭氏染色

革蘭氏染色是微生物檢測細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法。細菌先經堿性染料結晶紫染色，而后經碘液進行媒染，之后用酒精脫色，在一定條件下有的細菌媒染后的顏色不會脫去，有的可以被脫去，前者叫做革蘭氏陽性菌，后者為革蘭氏陰性菌。為方便進一步觀察，脫色后再用堿性蕃紅進行復染，陽性菌仍為紫色，陰性菌染成紅色，這就是革蘭氏染色的原理。其步驟包括初染、媒染、脫色、復染四個步驟，主要步驟如圖所示：

4. 芽孢染色法

部分細菌能產生內孢子，這些孢子能抵制細菌染色液的進入，在微生物檢測革蘭氏染色法涂片染色時，革蘭氏陽性菌的芽孢呈現無色。雖然芽孢在革蘭氏染色片中可以看到，但在不易清晰觀察時，可用特殊的芽孢染色法，使芽孢與菌體呈現不同顏色，便于觀察。主要的芽孢染色法有孔雀綠染色法和石碳酸復紅染色法。

孔雀綠染色法的具體步驟：首先將生有芽孢的斜面菌苔按革蘭氏染色法涂片后，用飽和孔雀綠水溶液染色10min，然后用自來水沖洗，沖洗完后用0.5%蕃紅液復染30s，用水洗，吸干，即可鏡檢，鏡檢時芽孢呈綠色，菌體和芽孢囊呈微紅色。

石碳酸蕃紅染色法具體步驟：首先按常規涂片，然后滴加石碳酸復紅于涂片上，并于玻片下緩緩加熱，使染液冒蒸汽但不沸騰，并繼續滴加染液，不使涂片上染液蒸干，這樣保持5min。帶涂片冷卻后，傾去染液，用酸性乙醇脫色指無紅色染劑洗脫為止，接著徹底水洗，洗后用呂氏美藍復染2-3min，水洗吸干后即可進行鏡檢，鏡檢時菌體計孢囊呈藍色，芽孢呈紅色。

上面就是顯微鏡廠家介紹的關于微生物檢測常見細菌染色方法二。

文章內容來源：環凱微生物